熒光分光光度計的基本結構與原理

熒光分光光度計的基本結構與原理

        熒光分光光度計是一種用于掃描液相熒光標記物發出的熒光光譜的儀器。它可以提供激發光譜、發射光譜、熒光強度、量子產率、熒光壽命、熒光偏振等多項物理參數，從各個角度反映分子的鍵合和結構。通過測量這些參數，不僅可以進行一般的定量分析，還可以推斷分子在各種環境中的構象變化，從而闡明分子結構和功能之間的關系。熒光分光光度計的激發波長掃描范圍一般為190~650nm，發射波長掃描范圍為200~800nm。可用于凝膠條等液體和固體樣品的光譜掃描。
        基本結構和原理
        高壓汞燈或氙燈發出的紫外光和藍紫光通過濾光片照射到樣品池中，激發樣品中的熒光物質發射熒光。熒光經過過濾和反射后，由光電倍增管接受，然后以圖形或數字的形式顯示出來。
        基本結構及原理，光源與探測器成直角排列。
         1、光源：
        高壓汞蒸氣燈或氙弧燈，后者能發出高強度的連續光譜，在300nm～400nm范圍內強度幾乎相等，故較常用。
         2、激發單色儀：
        放置在光源和樣品室之間的激發單色器或*單色器用于濾除特定的激發光譜。
         3、發射單色器：
        發射單色儀或第二單色儀置于樣品室和檢測器之間，單色儀常采用光柵。過濾掉特定的發射光譜。
         4、探測器：
        通常，光電管或光電倍增管用作檢測器。光信號可以被放大并轉換成電信號。
         5. 樣品室：
        由石英池（用于液體樣品）或固體樣品架（用于粉末或薄片樣品）組成。測量液體時，光源與檢測器成直角布置；測量固體時，光源與檢測器呈銳角排列。